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激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)是熒光檢測(cè)器檢測(cè)熒光的必要參數(shù)

點(diǎn)擊次數(shù):1147 發(fā)布時(shí)間:2022-04-24
  激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)是熒光檢測(cè)器檢測(cè)熒光的必要參數(shù)
  熒光檢測(cè)器的特性,使光源的能量分布、單色器的透射率和檢測(cè)器的響應(yīng)等性能會(huì)隨波長(zhǎng)而變,所以同一化合物在不同的儀器上會(huì)得到不同的光譜圖,且彼此間無(wú)類(lèi)比性,這種光譜稱(chēng)為表觀光譜。要使同一化合物在不同的儀器上能得到具有相同特性的熒光光譜,則需要對(duì)儀器的上述特性進(jìn)行校正。經(jīng)過(guò)校正的光譜稱(chēng)為真正的熒光光譜。
  激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)是熒光檢測(cè)的必要參數(shù)。選擇合適的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng),對(duì)檢測(cè)的靈敏度和選擇性都重要,尤其是可以較大程度地提檢測(cè)靈敏度。
  熒光屬于光致發(fā)光,需選擇合適的激發(fā)光波長(zhǎng)(Ex)以利于檢測(cè)。激發(fā)波長(zhǎng)可通過(guò)熒光化合物的激發(fā)光譜來(lái)確定。激發(fā)光譜的具體檢測(cè)辦法是通過(guò)掃描激發(fā)單色器,使不同波長(zhǎng)的入射光激發(fā)熒光化合物,產(chǎn)生的熒光通過(guò)固定波長(zhǎng)的發(fā)射單色器,由光檢測(cè)元件檢測(cè)。zui終得到熒光度對(duì)激發(fā)波長(zhǎng)的關(guān)系曲線就是激發(fā)光譜。在激發(fā)光譜曲線的zui大波長(zhǎng)處,處于激發(fā)態(tài)的分子數(shù)目zui多,即所吸收的光能量也zui多,能產(chǎn)生zui的熒光。當(dāng)考慮靈敏度時(shí),測(cè)定應(yīng)選擇zui大激發(fā)波長(zhǎng)。
  一般所說(shuō)的熒光光譜,實(shí)際上僅指熒光發(fā)射光譜。它是在激發(fā)單色器波長(zhǎng)固定時(shí),發(fā)射單色器進(jìn)行波長(zhǎng)掃描所得的熒光度隨熒光波長(zhǎng)(即發(fā)射波長(zhǎng),Em)變化的曲線。熒光光譜可供鑒別熒光物質(zhì),并作為熒光測(cè)定時(shí)選擇合適的測(cè)定波長(zhǎng)的依據(jù)。

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